茶葉、糧食中嘧菌環(huán)胺殘留量的高效液相色譜檢測(cè)法

本標(biāo)準(zhǔn)適用于茶葉、谷物類嘧菌環(huán)胺殘留量的檢測(cè)和確證，其它食品可參照?qǐng)?zhí)行。

原理：

試樣中殘留的嘧菌環(huán)胺經(jīng)正己烷-丙酮（1+1，體積比）提取，用凝膠滲透色譜柱和丙磺酰基甲硅烷基硅膠陽(yáng)離子交換柱凈化，氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)和確證，外標(biāo)法定量。

儀器：

凝膠滲透色譜儀：凝膠凈化柱：400 mm x 25 mm

氣相色譜-質(zhì)譜儀

固相萃取裝置

樣品粉碎機(jī)

振蕩器

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

氮吹儀

渦旋振蕩器

制備：

取代表性樣品約 500 g，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎并通過 2.0 mm 圓孔篩，混勻，裝入潔凈容器內(nèi)密封，標(biāo)明標(biāo)記。試樣于 4℃以下保存。

提取：

稱取5 g（茶葉稱取2 g）（精確至0.01 g）試樣，加入5 mL水混勻（茶葉、大米和花生需放置0.5 h），加入15 mL正己烷-丙酮（1+1，體積比）混合溶液，以10 000 r/min均質(zhì)0.5 min，加入5 g氯化鈉，搖勻，并于4 000 r/min離心3 min。吸取上層有機(jī)相于濃縮瓶中，殘?jiān)屑尤?5 mL正己烷-丙酮（1+1，體積比）混合溶液，重復(fù)提取一次，合并上層有機(jī)相，在45 ℃水浴中減壓濃縮至近干。準(zhǔn)確加入10.0 mL環(huán)己烷-乙酸乙酯（1＋1，體積比）溶解殘?jiān)?，供凝膠色譜凈化。

凈化：

將提取液轉(zhuǎn)移到離心管中，4 000 r/min 離心 3 min，將上清液轉(zhuǎn)移到凝膠滲透色譜儀的樣品瓶中，按 7.2.1.1 條件凈化,將收集液在 45 ℃以下水浴減壓濃縮至近干，加入 5 mL 甲醇溶解后，加入 5 mL水混勻。

定量：

根據(jù)樣液中嘧菌環(huán)胺含量的情況，選定峰面積相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液中嘧菌環(huán)胺響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體積穿插進(jìn)樣檢測(cè)。在上述色譜條件下，嘧菌環(huán)胺的保留時(shí)間約為 10.5 mim。

定性：

對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣液均按規(guī)定的條件進(jìn)行檢查，如果樣液與標(biāo)準(zhǔn)溶液在相同的保留時(shí)間有峰出現(xiàn)，則對(duì)其進(jìn)行質(zhì)譜確證，在扣除背景后的樣品譜圖中，所選擇離子全部出現(xiàn)，同時(shí)所選擇的離子的離子豐度比與標(biāo)準(zhǔn)品相關(guān)離子的相對(duì)豐度一致，波動(dòng)范圍符合表 2 的容許偏差之內(nèi)，可判定樣品中存在嘧菌環(huán)胺。被確證的樣品可判定為嘧菌環(huán)胺陽(yáng)性檢出。