上海滬鼎生物科技有限公司

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      錢經(jīng)理
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      上海市松江區(qū)新橋工業(yè)園區(qū)16號306室
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      ELISA試劑盒,豚鼠優(yōu)黑素(eumelanin)ELISA試劑盒
      ELISA試劑盒,豚鼠優(yōu)黑素(eumelanin)ELISA試劑盒
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      更新時間:2017-01-03 16:25:33瀏覽次數(shù):240

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      【簡單介紹】
      豚鼠優(yōu)黑素(eumelanin)ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中豚鼠優(yōu)黑素(eumelanin)的含量。
      【詳細說明】

      豚鼠優(yōu)黑素(eumelanin)ELISA試劑盒

       

      l       本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中豚鼠優(yōu)黑素(eumelanin)的含量。

      l       有效期:6個月

      l       保存條件:2-8℃

      l       本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

       

      實驗原理

      試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被豚鼠優(yōu)黑素(eumelanin)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豚鼠優(yōu)黑素(eumelanin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

       

      樣本處理及要求

      1.  血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
      2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

      3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mLPBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。*在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

      4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
      注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。

       

      標(biāo)本處理

      1.  本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。

      2.  實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對標(biāo)本進行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/LPBS稀釋(PH=7.0-7.2)。

      3.  若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。

      4.  使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。

      5.  若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。

      6.  某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。

      7.  建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。

       

      需要而未提供的試劑和器材

      1. 酶標(biāo)儀(450nm
      2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL20-200uL、200-1000uL
      3. 37℃恒溫箱
      4. 蒸餾水或去離子水

       

      試劑盒組成

      名稱

      96孔配置

      48孔配置

      備注

      微孔酶標(biāo)板

      8×12

      8×6

      標(biāo)準(zhǔn)品

      0.3mL*6

      0.3mL*6

      *

      6mL

      3mL

      檢測抗體-HRP

      10mL

      5mL

      20×洗滌緩沖液

      25mL

      15mL

      按說明書進行稀釋

      底物A

      6mL

      3mL

      底物B

      6mL

      3mL

      終止液

      6mL

      3mL

      封板膜

      2

      2

      說明書

      1

      1

      自封袋

      1

      1

      備注

      1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:120、60、30、15、7.5、0 pg/mL

      2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用*將標(biāo)本進行適當(dāng)稀釋后再進行實驗。

       

      注意事項

      1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
      2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
      3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
      4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
      5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
      6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
      7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
      8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
      9. 不能使用過期產(chǎn)品。
      10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

       

      試劑準(zhǔn)備

      試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

      2洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按120稀釋,即120×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

       

      操作步驟

      1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
      2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
      3.   樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
      4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
      5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
      6.   每孔加入底物AB50μL,37℃避光孵育15min。
      7.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

       

      實驗結(jié)果計算

      以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

       

      服務(wù)優(yōu)勢
      標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程我公司提供完整的技術(shù)咨詢與指導(dǎo)?,F(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。

       

      訂購說明
      1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
      2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
      3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日價格為準(zhǔn)。 
      4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
      5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

       

      質(zhì)量保證與免責(zé)聲明
      1、我們保證向用戶提供*合格的產(chǎn)品。如您認(rèn)為產(chǎn)品確實存在質(zhì)量問題,請在收 到產(chǎn)品21天內(nèi)并且產(chǎn)品使用量沒有超過一半前以書面方式提出,否則將不予受理或賠償。同時產(chǎn)品賠償只限于產(chǎn)品價值本身,不涉及其他任何損失。如果您的樣品 非常珍貴,請務(wù)必先使用適當(dāng)?shù)年栃詫φ者M行檢測,在檢測體系建立起來以后,再檢測您非常珍貴的樣品。
      2、若因用戶貯存或使用不當(dāng)所引起的質(zhì)量投訴,我們不予承擔(dān)責(zé)任。除質(zhì)量原因外的其它任何問題,例如缺乏使用某種試劑盒所需的儀器,訂購錯了試劑盒等,我們不承擔(dān)任何責(zé)任,也不接受非質(zhì)量原因引起的客戶投訴。
      3、如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品有任何缺漏或破損,請在收到產(chǎn)品后2個工作日內(nèi)通知我們。
      4、我們提供的所有產(chǎn)品*于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用,不得用于臨床診斷或治療,不得存放于普通住宅內(nèi)。如有單位或個人擅自改變我們產(chǎn)品的用途,或存放于不適當(dāng)?shù)牡胤?,我們不承?dān)任何責(zé)任。

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